2025-01-08 05:07:36
芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA,每個生物/醫(yī)學(xué)實驗室都用得起的單分子免疫檢測;
單分子的檢測原理:由Simoa數(shù)字免疫分析法實現(xiàn)的超靈敏度已在先前討論過。簡而言之,類似免疫分析中的酶-底物反應(yīng)是在相對較大的反應(yīng)體積(50-100?L)中進行的,在信號生成步驟中稀釋了產(chǎn)物分子。信號分子的擴散和稀釋將靈敏度限制在皮摩爾范圍內(nèi)。相比之下,Simoa通過將單獨標記的免疫復(fù)合物和底物限制在飛升大小的孔中,從而限制了熒光產(chǎn)物分子從酶-底物反應(yīng)中的擴散。當單一酶標簽催化底物轉(zhuǎn)化為熒光產(chǎn)物時,產(chǎn)生的熒光團被限制在孔中,從而在短時間內(nèi)產(chǎn)生可測量的熒光信號。芯棄疾JX-8B簡易版單分子ELISA檢測產(chǎn)品,極速檢測,檢測步驟只需要3次操作,遠遠快于常規(guī)ELISA;單分子蛋白數(shù)字ELISA微量樣本
芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA:芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA 具有超敏的優(yōu)勢:
超敏:芯棄疾.數(shù)字ELISA,與Simoa同樣的檢測方案,將檢測結(jié)果二維化,使用成像方式,可精確量檢測區(qū)多少個微球載體上發(fā)生免疫反應(yīng),具有陽性熒光信號,理論可達fg級;使用常規(guī)ELISA試劑,測試IL-6等演示指標,也可輕松達到亞pg級(0.2-0.5pg/mL);使用顯微圖像處理方法,得到數(shù)萬個磁珠中,陽性的個數(shù)和亮度,建立標準曲線,得到待測指標的濃度。極低濃度時,檢測信息為數(shù)字化信號,有效提高檢測靈敏度到0.2 pg/ml級; 單分子級別數(shù)字ELISA檢測用時芯棄疾JX-8B單分子ELISA檢測產(chǎn)品,少至可以進行8孔、4孔的靈活檢測。
芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA產(chǎn)品
每個生物實驗室都用得起的單分子免疫檢測
動力學(xué)上,對于200,000個微球分散在100μL中,珠子之間的平均距離約為80μm。大小為TNF-α和PSA(分別為17.3和30kDa)的蛋白質(zhì)將在不到1min的時間內(nèi)擴散80μm。表明,在2小時的孵育過程中,蛋白質(zhì)分子的捕獲不會受到限制動力學(xué)上。其次,必須有足夠的珠子被加載到陣列上以限制泊松噪聲。200,000個珠子加載到50,000孔陣列中,通常會導(dǎo)致20,000–30,000個微球被困在1mL孔中。對于典型的背景信號為1%活性微球(見下文),這種裝載導(dǎo)致背景信號為200-300個活性微球檢測到,對應(yīng)于泊松噪聲的可接受變異系數(shù)(CV)為6-7%。第三,過高的微球濃度可能導(dǎo)致:a)非特異性結(jié)合增加,降低信噪比;以及b)分析物與微球的比例過低,導(dǎo)致活性微球的比例過低,從而導(dǎo)致泊松噪聲引起的高CV。這些因素的平衡NatBiotechnol.作者手稿;可在PMC2010年12月1日獲得。Rissin等人第5頁因素意味著每100μLoftest樣品含有20萬到100萬顆珠子是比較好的數(shù)字ELISA。同時,為了獲得可接受的背景信號(1%)和泊松噪聲)。
創(chuàng)新性的解決方案:芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA應(yīng)用范圍:各種高靈敏多重免疫檢測,可替代各種ELISA試劑盒,及其他免疫檢測產(chǎn)品。蛋白質(zhì)生物標志物在區(qū)分健康和疾病狀態(tài)方面的臨床應(yīng)用,而監(jiān)測疾病進展則需要測量復(fù)雜樣品中的低濃度蛋白質(zhì)。目前的免疫測定方法測量的是蛋白質(zhì)的濃度高于10?12M,6而大多數(shù)在病癥7、神經(jīng)疾病8,9和接觸早期階段10中重要的蛋白質(zhì)的濃度被認為在10?16到10?12M之間。需要提高靈敏度的例子包括:一個由一百萬個細胞組成的1毫米?疾病,每個細胞分泌5000種蛋白質(zhì)到5升液體中。Simoa®由現(xiàn)任于哈佛大學(xué)醫(yī)學(xué)院的DavidWalt教授作為科學(xué)創(chuàng)始人于2007年創(chuàng)立。DavidWalt是美國的工程院,藝術(shù)院和醫(yī)學(xué)院三院院士。2010年,DavidWalt將Simoa®技術(shù)以封面文章的形式發(fā)表在《NatureBiotechnology》上,此技術(shù)開始為大眾所知并引起業(yè)界轟動。Simoa技術(shù)(Single-moleculeArray,Quanterix公司)特點是通用陣列化檢測,實現(xiàn)超高的靈敏度,較傳統(tǒng)ELISA方法能夠高出3個數(shù)量級,達到飛克級別(fg/ml)甚至更低。已拿阿茲海默癥的兩個FDAbreakthroughdevice;通常用于各種科研方向:神經(jīng)因子、蛋白組學(xué)、細胞因子等。 芯棄疾JX-8B簡易版單分子ELISA檢測產(chǎn)品,極速檢測,檢測用時只需要 15-30min!
芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA產(chǎn)品
每個生物實驗室都用得起的單分子免疫檢測
數(shù)字ELISA測量蛋白質(zhì)濃度遠低于傳統(tǒng)ELISA的能力源于兩種效應(yīng):1)SiMoA對酶標記的高度敏感性;以及2)通過數(shù)字化蛋白質(zhì)檢測可以實現(xiàn)的低背景信號。任何免疫測定的靈敏度由其靈敏度決定。檢測技術(shù)到標簽,抗體親和力,試驗背景,以及背景測量值的變異(%CV)27.SiMoA對酶非常敏感標簽(圖2)為在數(shù)字ELISA中檢測亞飛摩爾濃度的標記蛋白提供了基礎(chǔ)。也就是說,對于給定親和力的抗體,其靈敏度為免疫測定將由測定背景決定,SiMoA的高標記靈敏度有助于降低這種背景。對照實驗表明,數(shù)字ELISA的背景來自于檢測抗體和酶的非特異性結(jié)合(NSB)與捕獲珠表面結(jié)合(補充表2)。AsSiMoA相比傳統(tǒng)檢測方法具有更高的標記靈敏度,明顯減少了檢測抗體(~1nM)和酶標記物(1–50pM)的需要,以檢測結(jié)合事件,與傳統(tǒng)方法相比(標記試劑濃度~10nM)。降低的標記物濃度減少了NSB到捕獲表面,從而導(dǎo)致背景信號明顯降低。 數(shù)字化ELISA芯片,幫您數(shù)字化高靈敏檢測,且微量樣本多重指標檢測;單分子級別數(shù)字ELISA檢測用時
芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA,多重檢測,同一樣本就能測試2-6項指標;單分子蛋白數(shù)字ELISA微量樣本
芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA產(chǎn)品
每個生物實驗室都用得起的單分子免疫檢測
由于活性珠子的百分比接近50%(酶與微球的比例大于~1:1.5),然而,使用圖像分析軟件區(qū)分“開啟”和“關(guān)閉”孔變得具有挑戰(zhàn)性,我們達到了數(shù)字動態(tài)范圍的實際上限。例如,圖2中7fM(~45%活性)的信號偏離了線性。因此,這里使用50,000個孔展示的數(shù)字線性動態(tài)范圍是從3.5fM到350zM,即大約四個對數(shù)單位。前提是蛋白質(zhì)使用適當?shù)拿笣舛冗M行標記,這種動態(tài)范圍對于許多臨床應(yīng)用來說是足夠的 單分子蛋白數(shù)字ELISA微量樣本