2024-12-28 01:03:51
2mg組、4mg組、6mg組lh水平均上升,同樣,只有2mg組有明顯升高(p<),如圖3所示。表3表4②體重變化:(mean±sd),如圖4所示:2mg組(連續(xù)注射7天)與空白組相比,大鼠體重***下降(p<,注射第2天開始)。3mg組(連續(xù)注射7天)與空白組相比,大鼠體重***下降(p<,注射第4天開始),直至第12天*存活1只大鼠。4mg、6mg組(第1、8天注射)與空白組相比,大鼠體重分別在***次及第二次注射后的有***下降(p<),4mg組體重在停止給藥后4天與空白組無差異。③卵巢重量:如表5、圖5所示,2mg、6mg組大鼠在經(jīng)過順鉑注射后卵巢重量相比對(duì)照組,都有不同程度縮減,其中2mg組卵巢重量明顯減輕(p<),4mg、6mg組無明顯差異。表5④動(dòng)情周期觀察(陰道涂片):3mg組動(dòng)物死亡時(shí)間早,無完整的動(dòng)情周期。如表、圖6所示。正常大鼠動(dòng)情周期4-5天。分為四個(gè)階段,動(dòng)情前期:撇圓形有核上皮細(xì)胞占絕大多數(shù),白細(xì)胞和角化上皮細(xì)胞很少(圖a)。動(dòng)情期:角化上皮細(xì)胞占多大多數(shù),由散在增至集白細(xì)胞和有核上皮細(xì)胞很少(圖b)。動(dòng)情后期:片狀角化上皮細(xì)胞,有核上皮細(xì)胞和白細(xì)胞3種都有,無太大差異(圖c)。動(dòng)情間期:白細(xì)胞占絕大多數(shù),有核上皮細(xì)胞和角化上皮細(xì)胞很少(圖d)。表6⑤病理結(jié)果:如圖7所示。上海東寰告訴您如何選擇好的動(dòng)物模型。黃浦區(qū)Balbc裸鼠疾病動(dòng)物模型建模
該模型能夠幫助我們研究pirb基因在免疫系統(tǒng)和神經(jīng)系統(tǒng)的功能以及下游的調(diào)節(jié)機(jī)制。本發(fā)明的另一目的在于提供上述小鼠動(dòng)物模型的構(gòu)建方法。本發(fā)明所采用的**種技術(shù)方案是:pirb基因敲入的小鼠動(dòng)物模型,包括確定pirb基因的待敲入的特異性靶位點(diǎn)grna1和grna2,將pirb基因敲入c57bl/6j小鼠的rosa26基因的內(nèi)含子1內(nèi),所述grna1的基因序列如seqid**所示,grna2的基因序列如。本發(fā)明所采用的第二種技術(shù)方案為:pirb基因敲入的小鼠動(dòng)物模型的構(gòu)建方法,將步驟3中性成熟的陽(yáng)性f0小鼠分別與野生型鼠交配繁一代,獲得f1代雜合子小鼠,通過pcr、測(cè)序和southern雜交確定動(dòng)物基因型;將步驟4獲得的f1代雜合子小鼠近交獲得f2代純合子小鼠。普陀區(qū)肺病疾病動(dòng)物模型建模小鼠疾病建模請(qǐng)找上海東寰。
動(dòng)物模型名稱:皮膚淺II°及深I(lǐng)I°燙傷大鼠模型2、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種屬:SD大鼠3、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物性別:雌雄不限4、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物年齡:成年5、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體重:160-200g6、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境:SPF級(jí)1、實(shí)驗(yàn)方法:熱力致皮膚損傷法。麻醉大鼠,根據(jù)體重腹部備皮,然后固定于實(shí)驗(yàn)臺(tái)上。將大鼠移近加熱純凈水的燒杯,將紗布條浸入熱水中,待水溫恒定于99℃時(shí),取出紗布,立即平鋪于待燙部位,于紗布接觸大鼠皮膚后開始計(jì)時(shí)。致傷3s為淺II°燙傷,致傷10s為深I(lǐng)I°燙傷。2、檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn):a.皮膚大體觀察:致傷3s大鼠局部皮膚發(fā)紅、輕微水腫。愈合后毛發(fā)生長(zhǎng)良好,有少量紅褐**素沉著,皮膚輕微攣縮,表皮光滑;致傷10s大鼠局部皮膚發(fā)白、水腫。愈合后毛發(fā)生長(zhǎng)良好,皮膚瘢痕形成,表面粗糙不平。
目前鑒定出15個(gè)外顯子,外顯子1起始密碼為atg,外顯子15的終止密碼子是tga(轉(zhuǎn)錄本:)。pirb蛋白屬于i型跨膜糖蛋白,包含由六個(gè)免疫球蛋白樣結(jié)構(gòu)域(domain,d)組成(d1-d6)的胞外段,一個(gè)疏水的跨膜段,三個(gè)免疫受體酪氨酸依賴的抑制序列(immunoreceptortyrosinebasedinhibitorymotifs,itims)和一個(gè)itims樣序列組成的胞內(nèi)段。理論上講,pirb的分子量約為92kd,但是western-blot分析中,pirb經(jīng)常位于105kd處,因?yàn)閜irb是糖蛋白。以往研究發(fā)現(xiàn),pirb在免疫系統(tǒng)和中樞調(diào)節(jié)中均發(fā)揮重要作用。在免疫系統(tǒng)中,pirb在許多造血細(xì)胞都有表達(dá),包括b細(xì)胞、肥大細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、粒細(xì)胞和樹突細(xì)胞,但是在胸腺細(xì)胞、成熟的t細(xì)胞和自然殺傷細(xì)胞不表達(dá)。上海東寰為您提供完善的大鼠動(dòng)物疾病模型。
動(dòng)物模型名稱:固定制動(dòng)致制動(dòng)應(yīng)激大鼠模型2、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種屬:SD大鼠3、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物性別:雄性4、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物年齡:成年5、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體重:180~220g6、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境:SPF級(jí)。1、實(shí)驗(yàn)方法:采用固定制動(dòng)方法。大鼠每天固定5~6小時(shí)進(jìn)行制動(dòng)應(yīng)激,連續(xù)制動(dòng)40天。2、檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn):模型組大鼠體重增長(zhǎng)速度較正常對(duì)照緩慢;曠場(chǎng)試驗(yàn)的結(jié)果顯示,造模結(jié)束時(shí)與正常對(duì)照組比較,模型組大鼠的水平穿越格數(shù)、垂直運(yùn)動(dòng)次數(shù)、理毛時(shí)間均減少,**格停留時(shí)間、糞便粒數(shù)均增加;ELISA的結(jié)果顯示,造模結(jié)束時(shí)與正常對(duì)照組比較,模型組大鼠CRH、ACTH、CORT含量均明顯增高。可以嚴(yán)格控制實(shí)驗(yàn)條件,增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)材料的可比性。黃浦區(qū)疾病動(dòng)物模型建模購(gòu)買
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步驟3、pmsg處理c57bl/6雌性小鼠(6周齡,平均體重20g),46h后注射hcg,與雄性小鼠合籠交配,次日取受精卵進(jìn)行顯微注射,將步驟1的grna1、grna2、cas9蛋白以及線性化后的打靶載體一起注射到受精卵中,取注射后存活的受精卵移植到假孕母鼠體內(nèi),產(chǎn)出小鼠,即f0代小鼠。上述步驟中g(shù)rna1、grna2的濃度均為2~10pmol/ul,cas9蛋白的注射濃度為30~100ng/μl,cas9蛋白購(gòu)自newenglandbiolabs,貨號(hào)為m0386m。步驟4、提取f0代小鼠尾部dna,pcr擴(kuò)增產(chǎn)物測(cè)序,鑒定是否為嵌合體。本發(fā)明用于f0代小鼠pirb基因pcr鑒定的特異性引物如下:pcrprimers1(℃):5’armforwardprimer(f1):5’-tacgccacagggagtccaagaatg-3’5’kireverseprimer(r1):5’-gatggggagagtgaagcagaacg-3’pcrprimers2(℃):3’kiforwardprimer(f2):5’-ctgctgtccattccttattccatag-3’3’armreverseprimer(r2):5’-ctggaaatcaggctgcaaatctc-3’。primers1對(duì)應(yīng)的擴(kuò)增產(chǎn)物大小為,primers2對(duì)應(yīng)的擴(kuò)增產(chǎn)物為。用于f0代小鼠測(cè)序的引物如下:sequencingprimerforpcrproduct1:5’sequenceprimer(f3):5’-cacttgctctcccaaagtcgctc-3’sequencingprimerforpcrproduct2:3’sequenceprimer。黃浦區(qū)Balbc裸鼠疾病動(dòng)物模型建模